葉綠素酶進口試劑盒英文名稱:詳見說明書靈敏性高,高效性,原裝抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬elISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。48T/96T。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
流程:
1.實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2.加樣(標準品及樣本)100?L,37°C孵育1小時;
3.吸棄,加檢測溶液A100?L,37°C孵育1小時;
4.洗板3次;
5.加檢測溶液B100?L,37°C孵育30分鐘;
6.洗板5次;
7.加TMB底物90?L,37°C孵育10-20分鐘;
8.加終止液50?L,立即450nm讀數(shù)。
備試劑與收集血樣:
1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。
2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成1200ng/ml的溶液。設標準管8管,管加標本稀釋液900ul,至第八管加入標本稀釋液500ul。在管中加入1200ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。
3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。
4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)
檢測程序:
1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。
2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。
3.每孔中加入抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。
4.洗板:同前。
5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。
6.洗板:同前。
7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。
8.每孔加入100ul終止液混勻。
9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。